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熒光體視顯微鏡的構造及性能作用

發布人:發布時間:2014/9/10

    熒光體視顯微鏡就其構造來說,同一般顯微鏡相比具有許多特點,下面按部件分別加以敘述。


    1.照明器


    在熒先體視顯微鏡中,光在一系列濾光片上的損失是相當大的,只有很少的激光發光最終交為熒光。在大多數情況下熒光的最終產量只占光源發射光量的0.1%或者更低,因此熒光顯微鏡必須具有很強的光源。所有的白熾燈在光譜的藍紫范圍內只有很少的光產量,而這個范圍正是大多數熒光染料故激發的區域,因此自熾燈不適用于熒光體視顯微鏡,現在在熒光顯微鏡中經常使用100W和20OW的離壓汞燈成高壓氙燈,它們在近紫外和可見光的藍紫范圍內有較強的發射,高壓汞燈在光譜的365.404,436,546,577nm波長有發射峰,高壓氙燈在紫外和可見光范圍內有連續發射光譜,盡管這兩種氣體放電燈需要復雜的附屬設備,并且壽命較短、價格昂貴,但是它們在熒光體視顯微鏡中已經占有不可替代的位置。


    超高壓汞燈(或氙燈)的燈飽用對紫外光有很好通透性的石英玻璃制作。中間呈球形,內充一定數量的汞(氙燈)。工作時兩個電板間放電,引起汞(或氙)蒸發,燈內氣壓迅速上升,可達50-70個標準大氣壓,燈的亮度可達2萬熙提。


    由于這種氣體放電燈放出大量的熱量,因此燈室必須有良好的散熱條件,工作室溫度也不宜太高。這種燈啟動一次。工作時間越短,燈的壽命則越短,一般啟動后至少20分鐘才能關閉,注意盡量減少啟動次數。另外由于工作時燈內壓力很離,紫外線強烈。因此燈必須置于堅固的燈室之內,以免傷害人的眼睛,另外在萬一暴躁時不致傷人。


    2.集光器


    在熒光體視顯微鏡中,原來住用的是一般的明視野集光器。為了在觀察時能把最大強度的光聚集在標本上,通常集光器的孔徑應盡可能的大。由于物體的熒光在理論上可以被當作自發光體,因此集光器像的質量在熒光體視顯微鏡中實際上是不重要的,一個簡單的阿貝氏集光器就可以得到良好的效果。當用油浸系觀察時,一般使用數值孔徑在1.0以上的集光器,同時還必須使用對紫外光吸收很少的特制無熒光浸油,并且使用使用集光器浸潤。此外,這種浸潤還可以使用重蒸水或無熒光甘油。


    目前暗視野集光器在熒光體視顯微鏡中的應用日益廣泛,并有取代明視野集光盡的趨勢。達足因為使用暗視野集光器時,激發光不能直接進入物鏡。并且除散射光外,激發光也不進入目鏡,這就使得激發濾片可以大大減薄,從而顯著增大激發光的強度。而且阻斷濾片也可以很薄,這就增強了熒光圖像的亮度和反差,提高了像的質量,觀察也比較方便。

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